产品货号：
BTN3073
中文名称：
一管式病毒RNA提取试剂盒
英文名称：
One-tube virus RNA extraction kit
产品规格：
50次
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
本试剂盒是专用于血清(血浆)等液体样品中提取病毒RNA的纯化试剂。本产品回收率极高，尤其适合于整合到临床RT-PCR检测试剂盒中。且能用于提取其他液体样品和微量样品。
产品特点：
1.回收率达到90%以上，高于绝大部分基于离心柱的提取方法。
2.灵敏度高，RT-PCR检测到的最终灵敏度可以达到50-100拷贝/mL(对HIV和HCV)。
3.一管式操作，不使用离心柱，整个操作过程均在室温下完成。
4.无毒环保，不需要使用苯酚和氯仿等有毒的有机溶液。
5.可放量，如果加上病毒离心富集步骤，每管最多可以处理样品1.5mL。
试剂盒组成：
储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。
使用方法：
一：准备工作
1.血浆的抗凝剂必须是EDTA或ACD，不能是肝素。使用ACD时由于所加入ACD会增加体积，样品会被稀释，得到的病毒滴度会比使用EDTA低15%左右。
2.用于制备血浆的全血在2-25℃放置的时间不能超过6小时，在此时间内，可以室温800-1600g离心20分钟，上清即为血浆。
3.血浆可以在2-8℃或更低温度下运输，可以在室温放置一天，2-8℃放置5天，-20℃以下长期保存。
4.血浆最好按0.6mL/管的量分装保存，以避免反复冻融。
5.实验前所有试都必须放置在室温。
6.实验当天新鲜配制70%的乙醇。
二：病毒提取操作
1.标记1.5-2mL螺旋盖塑料离心管(如Sarstedt CAT#:782.694.006)，为避免污染，建议不要使用压盖式塑料离心管。注意设置阳性和阴性对照。
2.每管(包括正负对照管)中加入0.6mL病毒RNA提取试剂盒溶液(需提前融化)。
3.快速震荡样品几秒，再短暂离心，取0.2mL液体样品加入到已经装有0.6mL病毒RNA提取试剂盒溶液的管中。如果病毒需要富集，可以将1.5mL液体样品在4℃ 24,000g冷冻离心60分钟，移弃1.3mL上清后在取用样品。
4.在正负对照样品管中分别加正负对照样品。
5.室温放置10分钟。此间可以在每个管上做个标记，以在下步区别向心面和离心面。
6.振荡数秒后加入0.7mL室温异丙醇，旋紧盖后振荡30秒混匀，把离心管的向心面对向转头的中央，13,000-15000g室温离心至少15分钟。
7.小心移弃上清，注意不要触及管底和管壁离心面的RNA沉淀(此时可能看不见)。
8.加入1.0mL室温70%乙醇，振荡数秒后15000g室温离心5分钟。注意：在离心机中放置离心管时将其向心面对向转头的中央。
9.小心移弃上清，注意不要触及管底和管壁离心面的RNA沉淀(此时呈膜状沉淀)。
10.再短暂离心数秒，用移液器移弃残留液体(70%乙醇)，否则它会影响后续反应。
11.加入200μl RNase-free水或百奥莱博的1×液相RNase Scavenger(能灭活残留的RNase，而RNase-free水无此功能)，用移液枪仔细吹打离心管管底和管壁离心面的膜状RNA沉淀，溶液将呈混浊状，含少量不溶物。由于不溶沉淀物中含有RNA，所以不要离心后取上清使用，必须取混合液使用，哪怕很浑浊。
12.直接取适量用于RT-PCR，如果溶于200μl水，同时样品使用量不超过RT-PCR体系的1/2，不溶物一般不会影响RT-PCR。剩余样品可以室温放置2小时，也可保存于-80℃保存一个月。
疑难解答：
Q：提取液体样品/病毒核酸(RNA或DNA)为何很难？
A：原因一是量少。病毒颗粒中的RNA或DNA是作为遗传物质保存，每个病毒最多只携带几个拷贝(而一个细胞中有上万个RNA分子)，同时其长度也十分有限(是细胞基因组的万分之一以下)，样品中病毒数往往也不是很多，使得样品中核酸的绝对量几乎是微乎其微，十分容易丢失。另外，由于得到的核酸量少，不能使用电泳和测OD检测，只能通过PCR或RT-PCR检测，而病毒RNA往往具有稳定的二级结构，进一步增加了鉴定的难度(即不知道是RNA提取的问题还是RT-PCR的问题)。
Q：如何判断是病毒RNA没提取出来还是提取出来了但没有RT-PCR成功？
A：在RT-PCR反应中加阳性和阴性对照。
相关搜索：一管式病毒RNA提取试剂盒，One-tube virus RNA extraction kit
产品特点：
1.回收率达到90%以上，高于绝大部分基于离心柱的提取方法。
2.灵敏度高，RT-PCR检测到的最终灵敏度可以达到50-100拷贝/mL(对HIV和HCV)。
3.一管式操作，不使用离心柱，整个操作过程均在室温下完成。
4.无毒环保，不需要使用苯酚和氯仿等有毒的有机溶液。
5.可放量，如果加上病毒离心富集步骤，每管最多可以处理样品1.5mL。
试剂盒组成：
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 30ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。
使用方法：
一：准备工作
1.血浆的抗凝剂必须是EDTA或ACD，不能是肝素。使用ACD时由于所加入ACD会增加体积，样品会被稀释，得到的病毒滴度会比使用EDTA低15%左右。
2.用于制备血浆的全血在2-25℃放置的时间不能超过6小时，在此时间内，可以室温800-1600g离心20分钟，上清即为血浆。
3.血浆可以在2-8℃或更低温度下运输，可以在室温放置一天，2-8℃放置5天，-20℃以下长期保存。
4.血浆最好按0.6mL/管的量分装保存，以避免反复冻融。
5.实验前所有试都必须放置在室温。
6.实验当天新鲜配制70%的乙醇。
二：病毒提取操作
1.标记1.5-2mL螺旋盖塑料离心管(如Sarstedt CAT#:782.694.006)，为避免污染，建议不要使用压盖式塑料离心管。注意设置阳性和阴性对照。
2.每管(包括正负对照管)中加入0.6mL病毒RNA提取试剂盒溶液(需提前融化)。
3.快速震荡样品几秒，再短暂离心，取0.2mL液体样品加入到已经装有0.6mL病毒RNA提取试剂盒溶液的管中。如果病毒需要富集，可以将1.5mL液体样品在4℃ 24,000g冷冻离心60分钟，移弃1.3mL上清后在取用样品。
4.在正负对照样品管中分别加正负对照样品。
5.室温放置10分钟。此间可以在每个管上做个标记，以在下步区别向心面和离心面。
6.振荡数秒后加入0.7mL室温异丙醇，旋紧盖后振荡30秒混匀，把离心管的向心面对向转头的中央，13,000-15000g室温离心至少15分钟。
7.小心移弃上清，注意不要触及管底和管壁离心面的RNA沉淀(此时可能看不见)。
8.加入1.0mL室温70%乙醇，振荡数秒后15000g室温离心5分钟。注意：在离心机中放置离心管时将其向心面对向转头的中央。
9.小心移弃上清，注意不要触及管底和管壁离心面的RNA沉淀(此时呈膜状沉淀)。
10.再短暂离心数秒，用移液器移弃残留液体(70%乙醇)，否则它会影响后续反应。
11.加入200μl RNase-free水或百奥莱博的1×液相RNase Scavenger(能灭活残留的RNase，而RNase-free水无此功能)，用移液枪仔细吹打离心管管底和管壁离心面的膜状RNA沉淀，溶液将呈混浊状，含少量不溶物。由于不溶沉淀物中含有RNA，所以不要离心后取上清使用，必须取混合液使用，哪怕很浑浊。
12.直接取适量用于RT-PCR，如果溶于200μl水，同时样品使用量不超过RT-PCR体系的1/2，不溶物一般不会影响RT-PCR。剩余样品可以室温放置2小时，也可保存于-80℃保存一个月。
疑难解答：
Q：提取液体样品/病毒核酸(RNA或DNA)为何很难？
A：原因一是量少。病毒颗粒中的RNA或DNA是作为遗传物质保存，每个病毒最多只携带几个拷贝(而一个细胞中有上万个RNA分子)，同时其长度也十分有限(是细胞基因组的万分之一以下)，样品中病毒数往往也不是很多，使得样品中核酸的绝对量几乎是微乎其微，十分容易丢失。另外，由于得到的核酸量少，不能使用电泳和测OD检测，只能通过PCR或RT-PCR检测，而病毒RNA往往具有稳定的二级结构，进一步增加了鉴定的难度(即不知道是RNA提取的问题还是RT-PCR的问题)。
Q：如何判断是病毒RNA没提取出来还是提取出来了但没有RT-PCR成功？
A：在RT-PCR反应中加阳性和阴性对照。
相关搜索：一管式病毒RNA提取试剂盒，One-tube virus RNA extraction kit